### 产品名称

尊龙凯时猪伪狂犬病毒gE蛋白阻断ELISA抗体检测试剂盒

通用名：猪伪狂犬病毒gE蛋白阻断ELISA抗体检测试剂盒

英文名：Blocking ELISA Kit For Detection Pseudorabies Virus gE Antibody

### 包装规格

本试剂盒有以下包装规格：96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒。

### 预期用途

伪狂犬病，又称奥耶斯基氏病（Aujeszky's disease），是由伪狂犬病毒（Pseudorabies Virus，PRV）引起的一种急性传染病。这种疾病主要影响家畜及多种野生动物，表现为发热、奇痒及呼吸与神经系统疾病。该病的免疫预防疫苗为gE基因缺失疫苗，检测gE蛋白的抗体可以作为野毒感染的指标。本试剂盒专用于检测猪血清中抗伪狂犬病毒gE蛋白的抗体，并可有效区别临床感染的猪与接受gE基因缺失疫苗免疫的猪。

### 试剂盒组成

以下是各包装规格的试剂盒组成：

• 1. 酶标记物：11ml×1（红盖） / 11ml×2（红盖） / 26ml×2（红盖）
• 2. 样品稀释液：25ml×1（黄盖） / 50ml×1（黄盖） / 125ml×1（透明）
• 3. 20X浓缩洗涤液：40ml×1（白盖） / 40ml×1（白盖） / 200ml×1（透明）
• 4. 底物显色液：10ml×1（黑盖） / 10ml×2（棕盖） / 25ml×2（黑盖）
• 5. 终止液：5ml×1（黄盖） / 10ml×1（黄盖） / 25ml×1（黄盖）
• 6. 阳性对照：10ml×1（绿盖） / 15ml×1（红盖） / 20ml×1（红盖）
• 7. 阴性对照：10ml×1（绿盖） / 15ml×1（绿盖） / 20ml×1（绿盖）
• 8. 酶标板：96T×1 / 96T×2 / 96T×5
• 9. 盖板膜：125
• 10. 自封袋：112
• 11. 说明书：111
• 12. 稀释板：125

### 储存及有效期

本试剂盒应在2～8℃条件下保存，有效期为12个月。开封后的包被板需在2～8℃限光保存，避免潮湿，使用期限为2个月。

### 适用仪器

需配备630nm波长的酶标仪、37℃恒温设备和可调微量移液器。

### 样品准备

1. 取动物全血，4000r/min离心10分钟，收集血清；或待血液自然凝固后收集血清，确保血清清亮且无溶血。

2. 使用样品稀释液将待检血清按1:1稀释（例如，100μl血清加入100μl样品稀释液，混匀）。阴、阳性对照不需要稀释。

3. 使用前将浓缩洗涤液恢复至室温，20倍稀释为工作洗涤液，并确保结晶完全溶解。

温馨提示：应先在血清稀释板稀释所有待检血清，再转移至抗原包被板上，以保证反应时间一致。

### 检验方法

1. 使用前，将试剂盒放置在室温下30分钟以恢复至室温。

2. 按需求取酶标板条，各设阴性、阳性对照各2孔，其余未用的板条应密封保存于2～8℃。

3. 分别在阴、阳性对照孔加入100μl的阴、阳性对照；每个样品孔加入100μl的稀释样品。

4. 盖好盖板膜，并在37℃（推荐水浴）避光反应1小时。

5. 清除孔内液体，每孔加入300μl工作洗涤液，甩掉后重复洗涤5次，最后一次拍干。

6. 每孔加入100μl酶标记物，盖好盖板膜，在37℃避光反应20分钟。

7. 进行洗涤，与步骤5相同。

8. 每孔加入100μl底物显色液，在室温（20～25℃）避光反应10分钟。

9. 每孔加入50μl终止液，混匀，并在10分钟内于630nm测定各孔吸光值。

### 参考值

在实验正常情况下，阴性对照的平均OD值（ODNC）应≥0.6，阳性对照的平均OD值（ODPC）应≤0.5。

### 检验结果的判定

1. S为样品孔OD630nm值，N为阴性对照OD630nm平均值。若S/N≤0.6，则判定为阳性；若0.6＜S/N≤0.7，则判定为可疑；若S/N＞0.7，则判定为阴性。

2. 若实验结果为阳性，意味着该猪可能存在野毒感染，或使用了非gE基因缺失的疫苗。

### 实验方法的局限性

本检测结果仅供筛查使用，不作为确诊依据。

### 注意事项

• 实验期间请佩戴手套及工作服，严格遵循消毒隔离程序，处理实验废物时采取传染物处理措施。
• 终止液具有腐蚀性，避免接触皮肤及衣物，如不慎接触请及时用大量自来水冲洗。
• 若试剂盒内的阳性、阴性对照及酶标记物出现少量悬浮物，属正常现象。
• 从冷藏环境中取出的酶标板应在室温下恢复至室温后方可开袋，未用完的酶标板需置于干燥剂及密封袋中保存。
• 浓缩洗涤液在低温条件下易结晶，使用前需恢复至室温以确保完全溶解。
• 洗涤过程中确保各孔均加满液体，避免孔口残留游离酶未洗净。
• 用于检测的样品需保持新鲜。
• 实验结果判定需以酶标仪读数为准。
• 不同批号的试剂组分不得混用。